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( d ) Homology models obtained for a complex between Arhgef7 (cyan) and TC10 (green) are shown with Arhgef7 depicted in cyan and TC10 in green. Putative polar interactions between Arhgef7 and TC10 are represented by broken yellow lines connecting alpha-carbon atoms of each residue. ( e ) Bacterially expressed GST or GST-PBD that specifically binds active TC10 was coupled to glutathione-sepharose beads and incubated with lysates of HEK 293T cells transfected with the expression vectors for GFP-TC10 or GFP and HA-Arhgef7 (+) or pcDNA3.1-HA (−) in the presence (+) or absence (−) of a phosphatase inhibitor as indicated. Bound TC10 and the expression of comparable amounts of protein were analyzed by Western blot using anti-HA and anti-GFP antibodies or Coomassie Blue staining. Molecular weights are indicated in kDa. In order to test whether Arhgef7 can activate TC10, we transfected HEK 293T cells with expression vectors for TC10 and HA-Arhgef7 and determined the amount of active TC10 using a pull-down assay with the GTPase-binding domain (PBD) from PAK1 (GST-PBD) that binds active TC10 53,54 . Baixar betboo.Você joga como Devlin, um jovem adulto que tem o objetivo final de resolver o mistério do misterioso desaparecimento de seu pai. O número 1 no Top 10 dos melhores jogos pornôs é ser um DIK.
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